類器官厚樣本成像，徠卡共聚焦系統(tǒng)解決方案

自21世紀(jì)初，隨著干細(xì)胞研究和組織工程的重大突破，類器官及其在顯微成像中的應(yīng)用取得了顯著進(jìn)展。已開發(fā)的多種類器官模型，如大腦、肝臟和腸道類器官，為研究器官發(fā)育、疾病機(jī)制揭示及治療評估提供了新途徑。同時(shí)，類器官成像技術(shù)的發(fā)展極大地促進(jìn)了研究人員對這些復(fù)雜三維結(jié)構(gòu)以細(xì)節(jié)和動態(tài)模式進(jìn)行觀察的能力。盡管如此，類器官研究仍面臨多個(gè)挑戰(zhàn)，包括維持樣本活性、確保成像深度與分辨率，及處理和分析大量數(shù)據(jù)的需求。

共聚焦顯微鏡物鏡的發(fā)展，特別是用于觀察厚樣本的物鏡，對匹配樣本和周圍介質(zhì)的折射率至關(guān)重要，否則會影響成像深度。高數(shù)值孔徑的油浸物鏡雖然提供高分辨率，但當(dāng)用于水樣本時(shí)由于折射率不匹配而面臨限制，導(dǎo)致球面像差。這影響了能夠有效成像的樣本深度，并降低了圖像質(zhì)量。

為了解決這些挑戰(zhàn)，研究人員開始使用甘油作為一種折射率接近生物樣本的介質(zhì)，將樣本置于甘油中，并使用甘油物鏡進(jìn)行成像。隨著技術(shù)的進(jìn)步，甘油物鏡的設(shè)計(jì)和性能不斷改進(jìn)，成為現(xiàn)代顯微鏡中常見的物鏡類型之一。

如今，大多數(shù)固定樣本都使用基于甘油的Mowiol、Vectashield或類似混合物進(jìn)行封片。這些介質(zhì)的折射率接近80/20甘油/水混合物的折射率（ne=1.45）。甘油物鏡（介質(zhì)折射率1.46）是在這種介質(zhì)中封裝的樣本的更佳選擇。

由于折射率匹配，甘油物鏡減少了散射和光損失，在廣泛的波長范圍內(nèi)都具有較好的透明度，提高了圖像質(zhì)量和信號強(qiáng)度，因此可實(shí)現(xiàn)更深的成像深度