徠卡激光共聚焦掃描顯微鏡是一種先進的生物成像技術(shù),以其高分辨率、高對比度和三維重建能力而在科學(xué)研究和生命科學(xué)領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。采用激光束作光源,激光束經(jīng)照明針孔,經(jīng)由分光鏡反射至物鏡,并聚焦于樣品上,對標(biāo)本焦平面上每一點進行掃描。組織樣品中如果有可被激發(fā)的熒光物質(zhì),受到激發(fā)后發(fā)出的熒光經(jīng)原來入射光路直接反向回到分光鏡,通過探測針孔時先聚焦,聚焦后的光被光電倍增管(PMT)探測收集,并將信號輸送到計算機,處理后在計算機顯示器上顯示圖像。
一、特點:
1.采用激光束聚焦的方式,可實現(xiàn)亞微米級別的空間分辨率。
2.通過激光聚焦樣品表面進行掃描,不需要接觸樣品,因此不會對樣品造成任何損傷。
3.可以快速獲取樣品的三維結(jié)構(gòu)信息,而且可以進行實時成像,非常適合生物學(xué)和醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的應(yīng)用。
4.采用光學(xué)放大器件和高靈敏度探測器,可以檢測到非常微弱的光信號,提高了信號的檢測靈敏度。
5.可以進行熒光共聚焦顯微鏡、二次諧波顯微鏡、拉曼顯微鏡等多種功能掃描顯微鏡成像技術(shù)的結(jié)合,同時也可進行光學(xué)操作如熒光激發(fā)、光刻等。
二、應(yīng)用:
1.可以觀察細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能,對細胞分裂、凋亡等過程進行實時跟蹤和定量分析。
2.通過標(biāo)記神經(jīng)元和突觸蛋白,可以實現(xiàn)神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的可視化,揭示神經(jīng)回路的復(fù)雜結(jié)構(gòu)和功能。
3.可以用于研究腫瘤的形態(tài)學(xué)特征、血管系統(tǒng)的構(gòu)建以及藥物的作用機制,為生物醫(yī)學(xué)研究提供直觀的圖像基礎(chǔ)。
4.通過觀察植物細胞和組織的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)、葉片的氣孔結(jié)構(gòu)和根系的發(fā)育過程,可用于研究植物生長和環(huán)境適應(yīng)性。